盐酸法舒地尔对体外培养星形胶质细胞氧糖剥夺损伤的保护作用

目的 研究盐酸法舒地尔(FH)对大鼠皮质星形胶质细胞氧糖剥夺损伤(OGD)的保护作用.方法 传代培养的大鼠皮质星形胶质细胞与无糖Na2S2O42 mmol· L-1孵育4h,制备OGD模型.FH 5和10μmol·L-1在OGD前2h加入.采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活;比色法检测乳酸脱氢酶(LDH);乙炔基脱氧尿苷(EdU)掺入法检测星形胶质细胞DNA合成;Hoechst染色和丫啶橙(AO)/溴化乙啶(EB)荧光双染观察细胞凋亡;2,7-二氯氢化荧光素(DHCF-DA)荧光染色和硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验检测细胞内活性氧(ROS)水平.结果 与正常对照组比较,OGD模型组星形胶质细胞存活率为(24±6)％,下降了4倍(P＜0.01);OGD模型组LDH释放量显著升高至(366±7) U· L-1(P＜0.01).加入FH 5和10 μmol·L-1的预处理组,细胞存活率分别上升至(42±5)％和(43±5)％,LDH释放分别下降至290±18和(268±20) U· L-1(P＜0.01),细胞EdU阳性率由OGD模型组的(47±6)％,分别下降到(35±6)％和(29±5)％(P＜0.01).Hoechst染色及AO/EB双染实验结显示,FH能显著减少OGD损伤后细胞的凋亡及坏死,使晚期凋亡细胞比例减少(P＜0.05);DCFH-DA荧光和NBT还原实验显示,FH降低OGD损伤后ROS水平,且FH10 μmol·L-1的预处理组降低的幅度比5 μmol·L-1的预处理组更明显,但两组差异无统计学意义.结论 FH对传代培养的大鼠皮质星形胶质细胞OGD具有保护作用,其作用机制可能与降低细胞内ROS水平有关.