扁蓄苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、周期及PI3K/AKT信号通路的影响
Central South Pharmacy(2020)
Abstract
目的 探讨扁蓄苷对乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡、周期及PI3K/AKT信号通路的影响.方法 以不同浓度的篇蓄苷作用于体外生长至对数期的MDA-MB-231细胞48 h后,采用噻唑蓝染色(MTT)法检测扁蓄苷对细胞增殖的影响,Hoechst 33258染色观察细胞染色质固缩情况,流式细胞术检测细胞周期,Western-blot检测PI3K/AKT信号通路核心蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT表达水平,RT-PCR技术检测通路下游细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl及周期相关蛋白CDK2基因表达情况.结果 不同浓度的扁蓄苷(6.25、12.5、25、50、100 μmol·L-1)作用于MDA-MB-231细胞48 h后,细胞增殖活性受到抑制(P< 0.01),且具有浓度依赖性;扁蓄苷(12.5、50、100 μmol·L-1)作用细胞48 h后,细胞核染色质固缩;当扁蓄苷浓度为50 μmol·L-1时,S期细胞所占百分比显著增高(P<0.05),当扁蓄苷浓度为1 00 μmol·L-时,G2/M期细胞所占百分比显著增高(P<0.05);随着扁蓄苷浓度的增加,通路核心位点PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.01),细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bcl-xl、细胞周期蛋白CDK2基因表达水平下调(P<0.05).结论 扁蓄苷可抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,使细胞周期阻滞于S期、G2/M期,并诱导细胞凋亡.其机制可能是通过抑制PI3K/AKT信号通路下调Bcl-2、Bcl-xl、及CDK2基因表达进而诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡.
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