抗心律失常复方中药稳心颗粒的心脏安全性再评价

目的 整合在体、离体、细胞、分子多功能指标,观察抗心律失常复方中药稳心颗粒(WXKL)对大鼠心脏和豚鼠离体心脏心电图、心肌细胞表型及hERG离子通道电流作用,对心脏安全性再评价.方法 ①大鼠在体实验:WXKL72.9 g·kg-1剂量ig给予,连续7d,然后进行Ⅱ导联心电图记录.②豚鼠离体心脏实验:按照正常灌流液10 min,WXKL3×10-2 g·L-110 min顺序灌流,记录心电图.③高内涵细胞表型实验:H9C2心肌细胞加入WXKL1×10-2、1×10-3g·L-1 24h后,换成0.1 μmol·L-1Hoechst 33342、MitoTracker Deep Red FM 2种荧光分子探针作用20 min,再加入Rhod2 AM荧光分子探针作用30 min,进行活细胞成像.④全自动膜片钳Ionworks系统记录hERG通道电流实验:加入含有(1×10-2、l×10-2.5、1×101、1×10-3.4 g·L-1) WXKL的细胞外液,记录hERG通道电流,分析hERG通道活性Ix.结果①大鼠在体实验:与空白对照组比,WXKL72.9 g·kg-1及阳性药VER 3.6×10-2g·kg-1对P-R间期、QRS间期、QTs间期、心率差异无统计学意义.②豚鼠离体实验:与空白对照组相比,WXKL3×10-2 g·L-1组P-R间期、QRS间期、Q-T间期、心率并没有显著性差异,阳性药奎尼丁3.25×10-3g·L-1延长QRS间期、Q-T间期,减慢心率(P＜0.01),而P-R间期差异无统计学意义.③高内涵细胞表型实验:与空白对照组相比,各浓度WXKL对H9C2心肌细胞的数量、线粒体质量及细胞内钙流强度未显著性改变,而Ⅲ类抗心律失常阳性药胺碘酮在6.82×10-3 g·L-1剂量下则对H9C2心肌细胞有显著性改变损害.④全自动膜片钳Ionworks系统记录hERG通道电流实验:与空白对照组相比,各浓度的WXKL未显著性改变hERG通道电流,hERG通道活性没有差异,阳性药奎尼丁3.25×10-4g·L-1阻断hERG通道,抑制hERG通道活性(P＜0.01).结论 根据本研究首次建立的多指标综合评价方式,WXKL是一种对心脏较安全的抗心律失常复方中药.