基于核酸适配体的微流控芯片的构建及对循环肿瘤细胞筛选性能的测定

目的 构建一种具有骨肉瘤细胞靶向性的GaN微流控芯片,考察其对循环肿瘤细胞的筛选能力.方法 利用细胞指数富集的配基系统进化(Cell-SELEX)技术对人骨肉瘤细胞MG63核酸适配体进行筛选和合成,利用化学气相沉积法(CVD),在硅片上以Au为催化剂制备GaN纳米线形成GaN纳米结构基片,利用软刻蚀方法制备聚二甲基硅氧烷(PDMS)混沌混合芯片作为盖片,并通过生物素-亲和素将核酸适配体与基片、盖片相结合来制备具有骨肉瘤细胞靶向性的GaN微流控芯片,通过原子力显微镜对基片形貌进行表征,并考察微流控芯片对循环肿瘤细胞的捕获能力及对细胞活力的影响.结果 成功构建了一种具有骨肉瘤细胞靶向性的GaN微流控芯片,其平均高度、平均直径、粗糙度及表面积较原始硅片显著升高,纳米线的平均直径达到377.2 nm,对人骨肉瘤细胞MG63的捕获率为(95.34±5.4)％,对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的捕获率为(4.2±1.1)％,核酸外切酶作用20 min后,芯片上的循环肿瘤细胞的释放率为92.16％,培养20h后细胞活力与对照组细胞无显著性差异(P＞0.05).结论 成功制备具有骨肉瘤细胞靶向性的GaN微流控芯片,其在捕获能力、捕获特异性及生物安全性上具有良好效果,具有较好的应用前景.