大孔树脂-正相硅胶柱色谱法制备闹羊花二萜有效部位

首次建立了从羊踯躅果实中提取闹羊花二萜有效部位的工艺路线.以闹羊花毒素Ⅲ和闹羊花毒素Ⅵ的总含量和转移率为指标,采用HPLC-ELSD法测定其含量,用正交试验对提取工艺中乙醇浓度、溶剂量、提取时间、提取次数进行考察,确定的最优制备工艺路线为:羊踯躅果实粗粉加8倍体积的70％乙醇,回流提取2h,提取3次.提取液合并后经浓缩离心,取上清液上样于LSA-12S大孔树脂柱,每1L大孔树脂上样体积为2L上清液,上样流速2 BV/h,洗脱流速4 BV/h,径高比1∶7,依次用5 BV去离子水、7 BV 30％乙醇洗脱,收集含闹羊花毒素Ⅲ、Ⅵ的组分,浓缩干燥.将浸膏和正相硅胶按质量比1∶2拌样,上正相硅胶柱,硅胶用量30∶1,径高比1∶10,依次用二氯甲烷∶甲醇为20∶1和10∶1的洗脱液(各12 BV)洗脱,收集含闹羊花毒素Ⅲ、Ⅵ的组分,浓缩干燥至恒重,即得闹羊花毒素Ⅲ、Ⅵ总含量≥50％的闹羊花二萜有效部位.本制备工艺设备要求简单,高效、经济、环保,样品处理量大,便于工业化生产.