抗VEGF抗体Fab片段在大肠埃希菌中的可溶性表达策略
Chinese Journal of Pharmaceuticals(2017)
Abstract
抗血管内皮细胞生长因子(VEGF)抗体Fab片段能够抑制VEGF的促血管生成作用,在糖尿病性黄斑水肿等眼科疾病的治疗中有重要的应用价值.在基因工程中大肠埃希菌(Escherichia coli)是Fab片段蛋白的主要表达系统,然而Fab片段往往会在大肠埃希菌内形成不可溶的包涵体,而不具有生物活性.本研究从引入分子伴侣、重组蛋白诱导表达的温度、时间等方面入手,进行系统优化,使绝大部分Fab蛋白可以分泌到大肠埃希菌周质中,大大提高了抗VEGF抗体Fab片段的可溶性表达效率和生物学活性,为其工业生产奠定基础,同时也为其他种类重组Fab分子的可溶性表达提供借鉴.
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