SIRT1对卵巢癌CAOV3细胞增殖的影响及可能机制

目的：分析沉默信息调节因子1（ silent mating type information regulation 2 homolog 1，SIRT1）对人卵巢癌CAOV3细胞增殖的影响，并探讨可能的作用机制。方法利用Lipofectamine 2000转染体外培养的卵巢癌CAOV3细胞，分为正常对照组、阴性对照组和SIRT1－siRNA转染组。 RT－PCR和Western blot检测SIRT1的mRNA和蛋白表达水平；MTT检测RNA干扰SIRT1后24、48、72h CAOV3细胞增殖情况；流式细胞术检测RNA干扰SIRT1后CAOV3细胞周期分布；Western blot检测RNA干扰SIRT1后CAOV3细胞SIRT1、p53、p21蛋白表达水平和p53乙酰化状态；免疫共沉淀检测SIRT1蛋白和p53蛋白的相互作用。结果与阴性对照组相比， SIRT1－siRNA转染组72 h后SIRT1的mRNA和蛋白表达水平减少（P＜0．05）；SIRT1－siRNA转染组48、72 h后的细胞增殖率明显降低（P＜0．01）；SIRT1－siRNA转染组S期细胞在细胞周期中所占比例显著减少（P＜0．01），G1期细胞则明显增加（P＜0．01）；SIRT1－siRNA转染组p53和p21蛋白表达水平显著升高，p53处于高乙酰化状态（ P＜0．01）；在卵巢癌CAOV3细胞中SIRT1蛋白与p53蛋白存在相互作用。结论通过特异性干涉SIRT1的表达能够抑制卵巢癌CAOV3细胞的增殖，其机制可能为RNA干扰下调SIRT1的表达后，p53蛋白处于高乙酰化状态，继而增强了p53蛋白依赖的p21蛋白的转录激活，从而阻滞细胞周期，抑制细胞增殖。