PI3K和MAPK抑制剂对胃肠道间质瘤细胞系GIST-T1细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究胃间质瘤中(磷脂酰肌醇-3-激酶)PI3K和(丝裂原活化蛋白激酶)MAPK信号通路对FOXO1的活性调节及胃间质瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用PI3K信号通路抑制剂LY294002和MAPK信号通路特异性抑制剂UO126单独或联合处理细胞,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;Western blot检测FOXO1、p-FOXO1蛋白及信号下游蛋白Bcl2、Bax表达的变化;免疫荧光法检测FOXO1蛋白在GIST-T1细胞中的细胞定位的变化.结果 与DMSO组相比,LY294002和UO126单独、联合处理组GIST-TI细胞增殖明显受到抑制(P＜0.05),且呈时间依赖性.Western blot结果显示,总FOXO1蛋白表达水平未见显著变化,而p-FOXO1及Bcl2蛋白表达下降(P＜0.05),Bax蛋白的表达增加(P＜0.05).免疫荧光显示FOXO1在GIST-T1细胞中的细胞核移位明显增多.LY294002和UO126联合处理GIST-T1细胞较药物单独应用时作用效果显著增强(P＜0.05).结论 LY294002和UO126能够抑制GIST-T1细胞增殖;PI3K和MAPK信号通路能通过调节FOXO1蛋白磷酸化水平,使其转录活性受到抑制,进而抑制Bcl2的表达,增加Bax的表达,且2种抑制剂作用效果具有协同效应.