siRNA下调Gli基因表达对食管鳞癌KYSE-30细胞生物学行为的影响

Journal of China Medical University(2016)

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Abstract
目的 探讨Gli表达下调对食管鳞癌KYSE-30细胞周期分布和上皮-间质转化能力的影响及其分子机制.方法 将Gli1和Gli2 siRNA和空白对照siRNA分别转染KYSE-30细胞48 h,实时荧光定量PCR法检测Glil、Gli2 mRNA表达水平;Western blot法检测KYSE-30细胞Glil、Gli2、CyclinD1、Cyclin D2、p21、波形蛋白(Vimentin)和β-catenin蛋白的表达;流式细胞术检测KYSE-30细胞周期分布;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力.结果 与空白对照siRNA组相比,Gli1和Gli2 siRNA可明显抑制KYSE-30细胞Gli、Gli2 mRNA和蛋白表达,下调Cyclin D1、Cyclin D2、Vimentin和β-catenin蛋白的表达和增加p21蛋白表达,将细胞周期阻滞在G0/G1期并降低细胞的侵袭能力,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 Gli蛋白表达可能在食管鳞癌的发生发展中具有重要作用,下调Gli1和Gli2表达可导致食管鳞癌细胞增殖、细胞周期分布和上皮-间质转化能力的改变,这可能与Cyclin D1、Cyclin D2、p21、Vimentin和β-catenin蛋白变化相关.
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Key words
esophageal squamous carcinoma,Gli,cell cycle,epithelial-mesenchymal transition
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