补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞PI3K/AKT信号转导通路影响的实验研究

目的 观察补中益气汤含药血清对肺腺癌顺铂耐药细胞A549/DDP的抑制作用,并探讨其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白和mRNA表达的影响.方法 以SD大鼠制备高、中、低剂量的补中益气汤含药血清和空白对照血清.MTT法筛选最佳含药血清组.培养细胞分为空白血清组、最佳含药血清组、LY294002组(阻滞剂组)、最佳含药血清+LY294002组(联合组)和阴性对照组.免疫细胞化学方法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测PI3K、p-AKT蛋白和mRNA的表达情况.结果 随着含药血清浓度的升高,对顺铂的逆转倍数不断增加;中剂量含药血清作用48 h为最佳含药血清及最佳作用时间;最佳含药血清可使A549/DDP细胞中PI3K、p-AKT蛋白表达减少,与空白血清组比较差异有统计学意义(P＜0.05);补中益气汤诱导A549/DDP细胞PI3K、p-AKTmRNA表达显著减少,与空白血清组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),与阻滞剂联合作用p-AKTmRNA下降更为明显.结论 补中益气汤可通过降低A549/DDP细胞中PI3K、p-AKTmRNA的表达而影响PI3K/AKT信号转导通路,进而发挥对顺铂耐药的增敏作用.