MYCT1新转录本的克隆与表达分析

目的：确定MYCT1基因的转录起始点并克隆该基因新的转录本，探讨该基因的结构和功能。方法利用已知MYCT1的保守序列，应用5′-RACE技术确定转录起始点位置，结合3′-RACE拼接得到新转录本的精确全长；然后利用生物信息学软件对新转录本与MYCT1的cDNA序列及氨基酸序列进行对比分析；最后利用RT-PCR的方法分析新转录本的细胞表达谱。结果成功克隆得到长1106 bp的新转录本MYCT1-TV，其转录起始点位于ATG上游140 bp处。MYCT1-TV与MYCT1在结构上无明显差异，并广泛表达于各个细胞系。结论 MYCT1转录起始点的确定和新转录本MYCT1-TV的克隆，为进一步研究MYCT1基因的转录调控机制及基因功能奠定了实验基础。