星形胶质细胞影响神经干细胞突触表达的神经营养家族基因表达机制探讨

目的 探讨1-甲基-4苯基-吡啶离子(MPP+)和星形胶质细胞对神经干细胞突触素和生长相关蛋白43 (GAP-43)表达的影响,以及星形胶质细胞神经营养素家族基因表达变化,包括脑源性神经营养因子(BDNF),神经生长因子(NGF),神经营养素3(NT-3).方法 实验分为两步骤,第一步骤:PC12细胞分别经Mpp+诱导不同时间点(0h、24 h、48 h、72 h、96 h)后分为两部分,一部分应用流式细胞技术检测不同时间点PC12细胞凋亡率;另一部分与星形胶质细胞共育2d,然后收集各组细胞和各组细胞条件培养液,应用RT-PCR检测各组细胞BDNFmRNA、NGFmRNA和NT-3 mRNA表达变化;将各组细胞条件培养液对神经干细胞(NSC)进行诱导分化,免疫荧光检测神经干细胞(NSC)突触素(SYN)和GAP-43表达.结果 在MPP+作用48 h时间点,PC12细胞凋亡率达高峰(P＜0.05);与各组比较,与Mpp+诱导48 h后的PC12细胞共育48 h后的星形胶质细胞(C3组)BDNFmRNA表达(A=93.96±4.89)明显增高(P＜0.05),差异有统计学意义(P＜0.05),并且C3组星形胶质细胞条件培养液诱导的神经干细胞(NSC)突触素(SYN) (A=34.09±2.69)、GAP-43(A=49.36±5.98)表达明显升高,与其他组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);NGF mRNA与各组比较差异无统计学意义(P＞0.05);NT-3mRNA在各组中均未见到表达.结论 星形胶质细胞与MPP+诱导凋亡的PC12细胞共育后,星形胶质细胞BDNF基因表达明显增高,星形胶质细胞促进神经干细胞(NSC)突触素(SYN)和GAP-43表达,BDNF可能参与了这一过程.