蟾蜍灵通过程序性坏死途径诱导人胃癌细胞SGC-7901死亡

目的 探讨蟾蜍灵(Bufalin)诱导人胃癌SGC-7901细胞死亡过程中程序性坏死途径的发生机制.方法 体外培养SGC-7901细胞,于对照组加入RPMI 1640培养液,实验组加入不同浓度的蟾蜍灵(50、100、150、200 nmol/L),对照组与实验组细胞继续培养48 h.MTT法检测细胞活性,DAPI染色法观察细胞核形态改变,透射电镜观察细胞膜及细胞核改变,流式细胞术检测细胞坏死率,Western blotting法检测程序性坏死关键蛋白受体相互作用蛋白激酶1(receptor interacting protein kinase 1,RIP1)的表达.结果 MTT实验结果表明,蟾蜍灵对SGC-7901细胞的生长具有显著的抑制作用(P＜0.05).通过透射电镜可以观察到细胞坏死时的特征性改变,如细胞膜破裂、细胞内空泡的产生以及细胞器的崩解.DAPI染色显示,蟾蜍灵(100 nmol/L)处理细胞48 h后,无明显细胞凋亡特征性改变,如细胞核固缩、核碎裂、凋亡小体形成.与对照组相比细胞坏死率升高(P＜0.05).蟾蜍灵对程序性坏死途径关键蛋白RIP1的表达有促进作用(P＜0.05).结论 蟾蜍灵通过程序性坏死途径诱导SGC-7901细胞死亡.