白藜芦醇对肥胖者骨性关节炎软骨细胞的作用及对 TLR4、NF-κBmRNA表达的影响

目的：探讨白藜芦醇是否可通过抑制TLR4／NF-κB信号通路发挥抗骨性关节炎的作用。方法：采用两步酶消化法分离培养肥胖者骨性关节炎软骨细胞。免疫细胞化学染色及甲苯胺蓝染色对细胞进行表型鉴定。应用MTT法测定白藜芦醇对软骨细胞增殖活力的影响。 ELISA法检测细胞培养基上清TNF-α的水平。RT-PCR法检测TLR4、NF-κBmRNA表达水平。结果：软骨细胞Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色及蛋白多糖甲苯胺蓝染色呈阳性。白藜芦醇浓度在6．25～100μmol · L－1时对细胞增殖均无抑制作用，其中低浓度的白藜芦醇（6．25～12．5μmol· L－1）能促进细胞增殖（P＜0．05）。 IL-1β（10 ng· ml －1）能抑制细胞增殖（P＜0．05）。白藜芦醇浓度在6．25～12．5μmol· L－1时，对IL-1β诱导的细胞活力降低有显著抑制作用。相比对照组，IL-1β诱导组的培养基上清中TNF-α水平及软骨细胞TLR4、NF-κBmRNA 表达均明显增加（ P ＜0．01），而加入白藜芦醇（6．25～12．5μmol· L－1）处理后，TNF-α水平及TLR4、NF-κBmRNA表达均显著降低（ P＜0．01）。结论：白藜芦醇可能通过抑制TLR4／NF-κB信号通路发挥抗骨性关节炎效应。