槲皮素对家兔气管狭窄形成过程的影响及其机制研究

目的:探讨槲皮素干预良性气道狭窄的可能机制及SIRT1在其中的调控作用.方法:将18只家兔随机分为空白对照组、模型组、槲皮素组.除空白对照组外,其余组建立家兔气管狭窄模型.术后1～10d,空白对照组不予特殊处理,模型组予以生理盐水灌胃(120 mg/kg,1次/d),槲皮素组予槲皮素灌胃(120 mg/kg,1次/d).术后第11天将家兔安乐死,收集气管组织标本.运用实时荧光定量PCR(qPCR)检测白细胞介素6(IL-6)mRNA、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)mRNA的相对表达量;运用免疫组化检测SIRT1蛋白表达情况.在细胞实验部分,予脂多糖(LPS)刺激人胚肺成纤维细胞(WI-38),设置为空白对照组、模型组(LPS 100 ng/L)、槲皮素低剂量组(LPS 100 ng/L+槲皮素5μmol/L)、槲皮素中剂量组(LPS 100ng/L+槲皮素10 μmol/L)、槲皮素高剂量组(LPS 100 ng/L+槲皮素20 μmol/L).运用qPCR检测IL-6 mRNA、SIRT1 mRNA的相对表达量;运用Western blotting检测SIRT1蛋白表达情况.结果:动物实验中,模型组气管狭窄度大于空白对照组;与模型组对比,槲皮素组狭窄度减少;与空白对照组对比,模型组气管黏膜组织中SIRT1 mRNA和蛋白的表达下调,IL-6 mRNA表达上调;与模型组对比,槲皮素组SIRT1 mRNA和蛋白表达上调,IL-6 mRNA表达下调(均P＜0.05).细胞实验中,与空白对照组对比,模型组IL-6 mRNA表达上调,SIRT1 mRNA和蛋白表达下调;与模型组对比,槲皮素低、中、高剂量组IL-6 mRNA表达下调,SIRT1mRNA和蛋白表达上调(均P＜0.05);槲皮素低、中、高剂量组之间两两比较,IL-6 mRNA的表达差异有统计学意义(均P＜0.05);槲皮素中剂量组对SIRT1 mRNA和蛋白表达上调效应最明显,与低剂量组和高剂量组比较,均有统计学差异(均P＜0.05).结论:槲皮素可能通过上调SIRT1抑制炎症因子IL-6的表达,减轻炎症反应,从而改善家兔气管损伤后狭窄.