CSE和LPS刺激A549和RAW264.7细胞建立慢性阻塞性肺疾病体外细胞模型

目的:以A549细胞和RAW264.7细胞为范例,将烟雾提取物(CSE)和脂多糖(LPS)有机地结合,探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)细胞模型的建立.方法:不同浓度的CSE和LPS刺激A549细胞和RAW264.7细胞24 h、48 h、72 h后,CCK-8检测对细胞活力的影响,筛选不同细胞的适宜浓度.5％、10％、20％的CSE浓度梯度,500 ng/mL、1 000 ng/mL、1 500 ng/mL的LPS浓度梯度,1 000 ng/mL LPS+5％ CSE、1 000 ng/mL LPS+10％ CSE和1 000 ng/mL LPS+20％CSE的CSE+LPS浓度梯度对A549细胞活力的影响.2.5％、5％、10％的CSE浓度梯度,50 ng/mL、75 ng/mL、100 ng/mL的LPS浓度梯度,75 ng/mL LPS+2.5％CSE、75 ng/mL LPS+5％CSE和75 ng/mL LPS+10％CSE的CSE+LPS浓度梯度对RAW264.7细胞活力的影响.结果:CSE刺激A549细胞的适宜浓度为10％,LPS的适宜浓度为1 000 ng/mL,CSE+LPS的适宜浓度为1 000 ng/mL LPS+10％CSE,刺激时间为48 h.CSE刺激RAW264.7细胞的适宜浓度为5％,LPS的适宜浓度为75 ng/mL,CSE+LPS的适宜浓度为75 ng/mL LPS+5％CSE,刺激时间为48 h.结论:CSE和LPS联合刺激RAW264.7细胞和A549细胞,建立COPD体外模型,为COPD机制研究、药物筛选和研发提供可靠的技术平台.