miR-335在急性缺血性脑卒中表达下调及对钙调蛋白的调控作用

目的 检测微小RNA-335 在急性缺血性脑卒中( AIS)患者血清中的表达,并探讨其对钙调蛋白(CaM)调控的作用机制. 方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定106例AIS患者及98例健康对照组血清中miR-335表达情况;用生物信息学数据库查询分析miR-335对钙调蛋白编码基因CALM1的靶向结合关系;脂质体转染法将miR-335模拟物、抑制物以及相应阴性对照物分别转染至人脐静脉内皮细胞( HUVECs)中并进行细胞培养,采用逆转录PCR( RT-PCR)和Western blot分别检测干预后HUVECs中钙调蛋白mRNA和蛋白的表达水平. 结果 与健康对照组相比较,AIS组患者血清miR-335表达明显下调(P＜0. 01);生物信息学软件的查询分析显示CALM1存在miR-335潜在靶向结合位点;RT-PCR和Western blot检测结果显示miR-335模拟物组CaM mRNA和蛋白的表达水平较对照组显著下降(P＜0. 01),而miR-335抑制物组CaM mRNA和蛋白的表达水平较对照组显著增高(均P＜0. 05). 结论 急性缺血性脑卒中患者血清miR-335表达明显下降,表达下调的miR-335可能通过上调钙调蛋白的表达从而发挥重要作用.