二甲双胍对小鼠肝纤维化保护作用的研究

目的 初步探索二甲双胍对小鼠肝纤维化的保护作用及相关机制的研究.方法 将45只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组和二甲双胍治疗组,每组各15只.正常组给予橄榄油,经腹腔注射,2次/周,剂量为0.4 mL/kg;其余2组给予橄榄油、CCL4混合物处理,按1∶3比例,经腹腔注射,2次/周,剂量为0.4 mL/kg,建立肝纤维化模型.造模3周后,给予各组小鼠相对应药物,二甲双胍治疗组给予二甲双胍200 mg/次,1次/d,灌胃;正常组、造模组给予生理盐水,200mg/次,1次/d,灌胃.造模6周后处死小鼠,收集标本.分别检测血清中肝功能相关ALT、AST指标含量,进行HE、天狼星红染色,观察小鼠肝脏病理学变化,评估肝纤维化程度;免疫组化检测α-SMA变化.将LX-2细胞分为4组,即空白对照组、PDGF-BB组、PDGF-BB+ Met低剂量组和PDGF-BB+ Met高剂量组.空白对照组不做处理;PDGF-BB组给予10 ng/mL的细胞因子PDGF-BB诱导细胞活化;PDGF-BB+ Met低剂量组给予10 ng/mL的细胞因子PDGF-BB和5 mmol/L的二甲双胍;PDGF-BB+ Met高剂量组给予10 ng/mL的细胞因子PDGF-BB和10 mmol/L的二甲双胍.通过细胞克隆形成实验观察细胞增殖变化,Western blot检测各组细胞α-SMA变化.结果 经二甲双胍治疗后,肝功能相关指标ALT、AST含量较模型组明显降低(P＜0.01);肝脏HE、天狼星红染色显示,与模型组比较,二甲双胍治疗组假小叶形成减少,炎性细胞浸润减少,胶原沉积减少,即肝纤维化减轻.细胞克隆形成实验、Western blot实验显示,二甲双胍降低肝星状细胞增殖能力,抑制肝星状细胞活化.结论 二甲双胍可缓解肝纤维化发展,且机制可能与通过抑制肝星状细胞活化和增殖有关.