Runx3对银屑病患者Th1/Th2细胞平衡的影响及其作用机制

目的 检测Runx3在银屑病患者和健康人外周血CD4+T细胞中转录水平的表达,分析其对Th1/Th2细胞平衡的影响及在银屑病发病中可能的作用机制.方法 选取40例银屑病患者(银屑病组)和35例健康人(健康对照组),应用密度梯度离心法分离其外周血CD4+T细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Runx3转录水平的表达.将体外培养的银屑病患者的CD4+T细胞随机分为空白对照组(未经任何处理组)、阴性对照组(对照siRNA转染组)和Runx3 siRNA组(Runx3 siRNA转染组).采用Western blot检测沉默效果,流式细胞仪分析Th1、Th2细胞数目,酶联免疫吸附试验检测Th1和Th2细胞相关特异性分泌因子的表达水平,同时采用qRT-PCR和Westernblot检测Runx3对Th1/Th2细胞转录因子表达的影响.结果 银屑病组患者CD4+T细胞Runx3 mRNA的表达水平显著高于健康对照组(P＜0.01).与阴性对照组比较,Runx3 siRNA组银屑病患者CD4+T细胞中Runx3蛋白表达水平下降(P＜0.01),同时Th1细胞数目下降(P＜0.05),而Th2细胞数目上调(P＜0.05),且Th1/Th2细胞比值显著降低(P＜0.05);白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)表达水平显著下降(P＜0.01),IL-4、IL-10表达水平显著升高(P＜0.05);Th1型特异性转录因子T-bet的表达显著降低(0.73 ±0.06 vs 0.96 ±0.17)(P＜0.01),同时Th2型特异性转录因子GATA3的表达显著升高(1.27 ±0.11 vs 1.01 ±0.14)(P＜0.05).结论 Runx3在银屑病患者外周血CD4+T细胞中表达上调,并且可能通过调控Th1/Th2细胞相关特异性转录因子的表达引发Th细胞失衡,从而参与银屑病的病理发病进程.