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Stathmin基因磷酸化位点突变真核表达载体构建

Ming YANG,Fang LIN, Ting HE,Lin WANG,Ding-cheng WANG,Ke DONG,Hui-zhong ZHANG

Journal of Xinxiang Medical University（2016）

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Abstract
目的 构建Stathmin基因磷酸化位点突变载体,为Stathmin磷酸化功能的进一步研究提供实验基础.方法 通过设计磷酸化位点突变引物,运用聚合酶链反应分别将人Stathmin基因片段中4个丝氨酸磷酸化位点Ser16、Ser25、Ser38、Ser63突变为不能进行磷酸化的丙氨酸,插入真核表达载体pcDNA3.1,分别构建重组载体pcDNA3.1/Stathmin Ser16/A、pcDNA3.1/Stathmin Ser25/A、pcDNA3.1/Stathmin Ser38/A、pcDNA3.1/Stathmin Ser63/A,并进行基因测序鉴定.结果 基因测序鉴定重组载体结果表明,分别将Stathmin基因中Ser16、Ser25、Ser38、Ser63突变为丙氨酸.结论 成功构建了Stathmin磷酸化位点突变载体,为进一步研究Stathmin磷酸化的作用机制和功能奠定了基础.
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Key words
Stathmin,phosphorylation,point mutation,vector construction
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