自噬核心蛋白ATG101对米色脂肪细胞分化和产热的影响

目的:探究自噬相关蛋白101(autophagyrelated 101,ATG101)对米色脂肪细胞增殖、分化和产热过程的影响.方法:将小鼠血管基质细胞(stromal vascular fraction,SVF)向米色脂肪细胞诱导分化,运用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测诱导分化过程中(0、2、4、6和8 d)Atg101 mRNA和蛋白表达.使用慢病毒介导的shRNA在分化前敲减Atg101并诱导分化成米色脂肪细胞后,运用实时定量PCR检测成熟脂肪细胞(6 d)标志基因表达,油红O染色观察脂滴形态;同时检测分化过程中(0、2、4和6 d)产热相关基因的表达.结果:ATG101在米色脂肪细胞自然分化过程中表达量逐渐增加;Atg101敲减后,成熟米色脂肪细胞标志基因脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding pro-tein 4,Fabp4),诱导细胞死亡DNA片断化因子 α样效应因子(cell death-inducing DNA fragmentation factor-α-like ef-fector A,Cidea)和葡萄糖转运体4(glucose transporter 4,Glut4)的表达较对照组明显降低(均P<0.05),脂滴生成受损.同时,Atg101的敲减使米色脂肪细胞中产热相关基因PR结构域蛋白16(PR domain-containing 16,Prdm16),Cidea和解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,Ucp1)的表达也明显减少(均P<0.05).结论:ATG101参与米色脂肪细胞分化过程;下调ATG101表达影响产热功能发挥.