大鼠角膜穿通伤后局部应用 IL-10抑制视网膜炎症和抗神经溃变的研究

目的：观察角膜穿通伤后局部应用 IL-10对视网膜炎症反应的抑制和对神经溃变的保护作用。方法：将清洁级成年雌性 SD 大鼠50只，随机分为对照组（8只）、损伤组和治疗组，后两组（每组21只）再分为损伤1 d、2 d 和3 d 组（每小组7只）。损伤组用无菌注射器刺穿眼球颞侧角膜缘角膜，制作角膜穿通伤模型。治疗组在角膜穿通伤后用 IL-10溶液滴眼。各组2只大鼠用于制作眼球切片，免疫荧光染色观察角膜穿通伤后炎症因子 IL-1β、IL-6和 TNF-α以及神经丝蛋白-200（neurofilament protein-200，NF-200）、血影蛋白（α-Ⅱspectrin）及钙蛋白酶2（m-calpain）在视网膜中的分布特征；另5只大鼠用于提取视网膜蛋白，采用免疫印迹法检测各组大鼠于角膜穿通伤24，48，72 h 后，视网膜组织内 NF-200和血影蛋白降解产物以及活性钙蛋白酶2相对含量的动态变化。结果：对照组视网膜结构层次清楚， IL-1β、IL-6、TNF-α和 m-calpain 免疫荧光很弱；血影蛋白和 NF-200免疫荧光染色可清晰显示阳性神经纤维；角膜穿通伤后，视网膜结构层次模糊，TNF-α、IL-1β，IL-6和 m-calpain 免疫荧光增强，主要分布在内层；NF-200和血影蛋白免疫荧光染色显示阳性神经纤维明显减少；IL-10治疗后，TNF-α、IL-1β，IL-6和 m-calpain 免疫荧光减弱，血影蛋白和 NF-200阳性神经纤维明显多于损伤组。免疫印迹检测结果表明，损伤组视网膜组织内大分子的 NF-200和血影蛋白含量逐渐减少，其小分子的降解产物以及小分子的活性 m-calpain 逐渐增加；在 IL-10治疗组，NF-200和血影蛋白的降解产物以及活性 m-calpain 的增加程度明显减轻。结论：角膜穿通伤可刺激视网膜细胞高表达炎症因子 IL-1β，IL-6和TNF-α，导致组织的炎症损伤，同时激活 m-calpain，后者降解视网膜细胞骨架蛋白 NF-200和血影蛋白，造成神经溃变；局部应用 IL-10可减轻炎症反应，抑制 m-calpain 对骨架蛋白的降解，从而对视网膜细胞产生保护作用。