人参皂苷Rg1促进移植大鼠的组织工程血管内皮化

目的 包载人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1,Rg1)构建促内皮化的组织工程血管(tissueengineered blood vessels,TEBVs),并移植大鼠颈总动脉以观察其通畅情况和内皮化效果.方法 CCK-8 和流式细胞凋亡检测培养48 h后Rg1对内皮细胞(endothelial cells,ECs)增殖和凋亡的影响,同时确定药物适宜工作浓度;将ECs分为对照组(普通培养基)、Rg1处理组(15.63 μmol/L Rg1培养基)和联合处理组[15.63 μmol/L Rg1 +0.5 μg/mL血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2)抑制剂XL184培养基],检测各组细胞培养48 h后增殖和划痕愈合情况;构建壳聚糖包被的Rg1-(2-羟丙基)-γ-环糊精颗粒(Rg1-HGC/CS NPs,以下简称NPs)并修饰至胶原血管内腔面,进行FTIR、DLS和SEM检测;体外条件下,将ECs与脱细胞血管和构建的TEBVs共培养48 h,观察其生物相容性;动物实验分为胶原组(胶原处理的血管)、空白CS组(空白CS处理的胶原组血管)和实验组(NPs处理的胶原组血管),将其移植至SD大鼠的左侧颈总动脉;分别于30、90 d后使用超声和Micro-CT检查血管通畅情况;使用HE、Masson和(CD31+vWF)免疫荧光观察90 d后血管的内皮化效果.结果 Rg1通过VEGFR2对ECs产生促进增殖和迁移的作用(P＜0.05),未见明显的凋亡影响;所构建的NPs粒径约为130 nm,大小均一(PDI＜0.3),并已成功修饰至血管内腔面;共培养实验表明,所构建的TEBVs生物相容性较好,利于细胞贴附生长;移植30、90 d后的影像学检测显示,实验组较其他组通畅度良好;移植90 d后的HE、Masson切片染色显示,胶原组和空白CS组的血管发生形变,失去正常结构,且因血栓和胶原纤维增生而发生阻塞,而实验组血管外形完整且无明显阻塞;CD31和vWF免疫荧光显示,实验组血管内腔面均匀覆有ECs,内皮化效果较其他组良好.结论 所构建的促内皮化TEBVs可促进血管的内皮化进程,维持血管移植后的远期通畅.