RNA结合蛋白TTP对肺腺癌细胞增殖影响的实验研究

目的 探讨TTP(tritetraprolin)过表达对肺腺癌细胞增殖影响及其可能的作用机制.方法 构建带有四环素可调控(tetracycline-on,Tet-on)的TTP基因表达系统,利用慢病毒感染的方法转染肺腺癌H1975及1299细胞,并在强力霉素(doxycycline,Dox)的诱导下稳定表达TTP.用实时荧光定量PCR和Western blot鉴定TTP受Dox调控表达的效果.分别采用CCK-8法、Transwell、平板克隆形成实验、流式细胞术检测TTP过表达后对细胞增殖、迁移、集落形成能力、凋亡和细胞周期的影响.Western blot法检测TTP过表达对凋亡基因在蛋白水平表达的影响.结果 成功构建受Dox诱导调控的TTP过表达肺腺癌细胞模型.与TTP低表达组比较,Dox诱导TTP过表达组明显抑制H1975、H1299细胞增殖、迁移能力(H1975:P＜0.01,H1299:P＜0.001)及集落形成能力(P值均＜0.0001),且使H1975细胞周期被阻滞在S期(P＜0.01),但TTP过表达不影响肺腺癌细胞凋亡.结论 TTP过表达显著抑制肺腺癌细胞增殖、迁移、集落形成能力,使细胞周期被阻滞在S期,但TTP过表达不通过细胞凋亡途径影响肺腺癌细胞增殖和生长.