脂氧素抑制关节炎大鼠滑膜及IL-1β刺激的RSC-364细胞中VEGF的表达

目的 探讨在体内外脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响及其可能机制.方法 SD雄性大鼠(6～8周龄,200～250 g,32只)分为正常对照组、BML-111单独处理组(BML-111)、佐剂诱导的关节炎(adjuvant arthritis,AA)模型组及BML-111干预组(AA+ BML-111),每组8只.AA组通过左后足跖部注射弗氏完全佐剂诱导建立AA动物模型,AA+ BML-111组于造模后每日腹腔注入LXA4受体激动剂BML-111.28 d后,取病变关节滑膜组织,匀浆后ELISA法检测VEGF水平,免疫印迹法检测VEGF受体2(VEGFR2)总蛋白水平及磷酸化水平.体外培养RSC-364大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocyte,FLS),采用白细胞介素-1β(interleukin lβ,IL-1β)诱导VEGF表达,加入空白溶剂或不同浓度LXA4(1～100 nmol/L)共同孵育24 h后,ELISA法检测上清液中VEGF水平,免疫印迹法检测P38、JNK和ERK的总蛋白水平及磷酸化水平,免疫印迹法检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factors 1α,HIF-1α)蛋白含量.结果 在AA大鼠滑膜组织,BML-111明显降低VEGF水平(P＜0.01),对VEGFR2表达无明显影响,但显著降低磷酸化VEGFR2的水平(P＜0.01).在FLS细胞,LXA4剂量依赖性抑制IL-1 β诱导的VEGF表达(P＜0.01),显著降低P38(P＜0.05)、JNK和ERK磷酸化水平(P＜0.01),下调HIF-1α含量(P＜0.01).结论 LXA4可能通过抑制MAPK、HIF-1α下调RSC-364细胞中IL-1β诱导的VEGF表达,影响AA大鼠模型中血管新生和血管翳的形成.