H2-Eb1+H2-Ab1双基因敲除小鼠的鉴定及繁育

目的 饲养、繁殖和鉴定H2-Eb1+H2-Ab1双基因敲除小鼠,获得双纯合子H2-Eb1-/-+H2-Ab1-/-及双野生型H2-Eb1+/++H2-Ab1+/+小鼠,为深入研究H2-Eb1、H2-Ab1的基因功能奠定基础.方法 基因敲除小鼠经适应性饲养2 w后,分别将雌性杂合子和雄性杂合子小鼠合笼饲养并繁殖,提取鼠尾DNA,利用PCR法鉴定其基因型.生产后代中的野生型和纯合子小鼠用于后续的生物学功能研究,杂合子小鼠用于繁殖及保种.结果 小鼠成功繁殖,其中双纯合子H2-Eb1-/-+H2-Ab1-/-20只(20％),双野生型H2-Eb1+/++H2-Ab1+/+26只(26％),未鉴定出基因型54只(54％).成功获得H2-Eb1+H2-Ab1双基因敲除纯合子小鼠,并建立了饲养、繁殖和鉴定方法.结论 采用雌性和雄性H2-Eb1+H2-Ab1双基因敲除杂合子小鼠交配,不仅可以获H2-Eb1+H2-Ab1双基因敲除纯合子小鼠,而且有利于长期饲养与繁殖.