激活 Shh 信号通路影响结肠癌细胞上皮间质表型转化的研究

目的：阐释激活 Shh 信号通路对结肠癌上皮间质表型转化（EMT）的影响。方法常规培养结肠癌细胞株 HT-29细胞，设立对照组（培养液中加入 PBS）、实验组（即信号通路活化，培养液中加入重组 Shh 配体）；采用 Westen-blot 检测 E-cadherin 和 Vimentin 蛋白表达水平的变化；RT-PCR 检测上皮间质转化标志物 E-cadherin和 Vimentin 在 mRNA 水平的变化；行 HE 染色观察细胞形态变化的改变。结果Westen-blot 检测蛋白提示，结肠癌 HT-29细胞中，Shh 信号通路激活可促进 Vimentin 蛋白表达（P ＜0．05），抑制 E-cadherin 蛋白表达（P ＜0．05）；RT-PCR 检测：实验组中 E-cadherin 和 Vimentin 的 mRNA 表达量差异具有统计学意义（P ＜0．05），与对照组相比较，实验组的 Vimentin 的 mRNA 表达量显著升高（P ＜0．05），E-cadherin 的表达量明显降低（P ＜0．05）；HE 细胞染色提示对照细胞呈梭形，细胞间更紧密地连接，并与信号通路阻断组细胞无显著差异，而实验组细胞呈椭圆形或圆形，连接疏松，部分细胞呈团簇集群样生长。结论 EMT 在结肠癌转移过程中起着重要的作用，而Shh 信号通路的激活可促进结肠癌细胞 EMT 的发生、发展。