大蒜素上调蛋白亚硝基化抗动脉粥样硬化研究

目的：观察大蒜素对高胆固醇饮食诱导的 apoE-/-小鼠动脉粥样硬化进展的影响,并从蛋白亚硝基化方面探讨其可能的作用机制。方法30只 apoE-/-小鼠随机分3组：对照组(生理盐水,ig)、低剂量组(大蒜素,9 mg/kg·d, ig)、高剂量组(大蒜素,18 mg/kg·d,ig)。高胆固醇饮食喂养12周,分别于第0、4、8、12周采血检测血脂水平,处理结束后,检测血浆氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和一氧化氮(NO)水平；利用苏木精伊红染色与范吉尔森弹性纤维染色观察主动脉根部组织学变化；免疫组化染色检测动脉粥样硬化斑块内巨噬细胞和血管平滑肌细胞含量；免疫荧光观察主动脉根部蛋白亚硝基化水平的变化。另外,以人脐静脉内皮细胞为体外模型,将其与 ox-LDL(50μg/mL)共同培养24 h,并用不同剂量(10μmol/L 和20μmol/L)大蒜素加以处理,分别采用硝酸还原酶法和免疫荧光法检测细胞上清 NO 及细胞蛋白亚硝基化水平。结果组织学分析发现,大蒜素组小鼠主动脉根部斑块面积及斑块内巨噬细胞和血管平滑肌细胞含量明显较对照组少(P <0.05)。与对照组相比,大蒜素组小鼠血浆 MDA、ox-LDL、TNF-α水平明显降低(P <0.05),血浆 NO 水平及主动脉根部蛋白亚硝基化水平明显升高(P <0.05),但对其血脂水平无明显影响。体外实验结果显示,与对照组相比,大蒜素能够显著恢复由 ox-LDL 所导致的人脐静脉内皮细胞的 NO 和蛋白亚硝基化水平的减少(P <0.01)。结论大蒜素能够有效抑制动脉粥样硬化的进展,其作用机制可能与大蒜素通过上调内皮细胞蛋白亚硝基化水平所发挥抗氧化应激和抗炎作用有关。