结核多表位DNA疫苗免疫效果及其对小鼠耐药结核病的疗效观察

目的：研究比较结核分枝杆菌 Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位 DNA 疫苗和卡介苗(BCG)的免疫效果,观察该疫苗联合抗结核药物治疗耐药结核病小鼠的疗效。方法随机将BALB/c 小鼠分成 A、B、C组,分别用 PBS、BCG和多表位DNA疫苗经皮下免疫,1、3、5周各免疫1次。免疫后眼球采血,分离血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法测定特异性 IgG抗体,用 ELISA双抗体夹心法测定 IL2和 IFN-γ；同时分离小鼠脾细胞,用 MTT法测定淋巴细胞增殖指数。为观察多表位疫苗的疗效,小鼠尾静脉注射结核分枝杆菌双耐菌株(耐利福平和耐异烟肼),4周后将感染模型小鼠随机分成D、E、F3组,其中D组为阴性对照,注射生理盐水；E 组用利福平、异烟肼治疗；F 组为联合用药组,用结核分枝杆菌 Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位DNA 疫苗和利福平、异烟肼联合治疗,疗程均为10周。治疗结束后称取小鼠体重,取其肺、肝、脾,称取质量,并作肺和脾脏菌落计数。结果多表位 DNA 疫苗组小鼠血清特异性IgG抗体、IL2、IFN-γ和淋巴细胞增殖指数均明显高于PBS组和BCG组(P<0.05)；多表位 DNA疫苗联合抗结核化疗药能明显降低耐药结核病小鼠肺、脾菌落计数和肺、肝和脾脏指数(P<0.05)。结论结核分枝杆菌 Hsp70、Ag85 A、ESAT-6多表位DNA疫苗能在小鼠体内诱导较强的特异性免疫反应,产生高水平的特异性 IgG 抗体、诱导IL2和 IFN-γ分泌和特异性淋巴细胞增殖,并能显著提高抗结核药物对耐药结核病小鼠的疗效。