DNA甲基化的焦磷酸测序通过率

目的 研究不同的PCR产物投入量(2.5 μL,5μL和10 μL),对焦磷酸测序通过率的影响.方法 从20例酒依赖患 者和20例健康对照全血样本中提取DNA.按各样本的DNA用量200 ng进行亚硫酸盐转化,经PCR扩增后,按PCR产物不同投入量(2.5 μL,5.0 μL和10.0 μL),对目的基因序列进行焦磷酸测序.结果 比较各组平 均峰高值和焦磷酸测序通过率,5 μL体系的平均峰高以及焦磷酸测序通过率均高于2.5 μL体系;10.0μL体系高于5μL体系,10 μL体系为最佳.3组平均峰高和焦磷酸测序通过率,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在DNA量统一为200 ng进行亚硫酸盐转化的前提下,所得PCR产物投入量以10 μL为最佳,焦磷酸测序通过率最高,达100％.