衰老对大鼠骨骼肌组织内质网氧化还原酶-1αDNA甲基化的影响

目的 探讨衰老对大鼠骨骼肌组织内质网氧化还原酶-1α(ERO1α)DNA甲基化与内质网应激及凋亡相关蛋白表达的影响.方法 以6月龄大鼠为成年组,18月龄大鼠为老年组,每组10只,建立动物模型.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot方法分别检测成年组与老年组大鼠骨骼肌组织中凋亡相关基因Bcl-2、Caspase 3、Caspase 9、Caspase 12和内质网应激相关基因ATF6、CHOP、GRP78、XBP-1的mRNA和蛋白表达水平;qRT-PCR和Western blot检测ERO1α的mRNA和蛋白表达水平;巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)法检测ERO1αDNA甲基化水平的改变.结果 与成年组比较,老年组大鼠骨骼肌组织中Bcl-2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01),Caspase 3、Caspase 9、Caspase 12的mRNA和蛋白表达水平均升高(P均<0.01);老年组内质网应激相关指标ATF6的mRNA表达改变与成年组比较差异无统计学意义(P>0.05),而ATF6蛋白表达水平增加(P<0.001);CHOP、GRP78、XBP-1的mRNA和蛋白表达水平较均成年组升高(P均<0.01);老年组大鼠骨骼肌组织中ERO1αmRNA和蛋白表达水平均降低(P均<0.01),而ERO1αDNA甲基化水平升高(P<0.01).结论 衰老大鼠骨骼肌组织ERO1αDNA高甲基化与内质网应激及凋亡相关蛋白的表达水平改变及骨骼肌细胞凋亡有关.