JNK对舒芬太尼预处理缺氧/复氧损伤心肌细胞Cx43表达的影响

目的 探讨舒芬太尼预处理对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞缝隙连接蛋白43(Connexin 43 Cx43)表达的影响及JNK(c-Jun N-terminal kinases)蛋白激酶信号通路的作用.方法 原代SD大鼠心肌细胞培养5d后,检测细胞纯度;使用95％N2+5％C02混合气体饱和的缺氧液,无氧环境下孵育2h后正常培养1h以建立缺氧/复氧模型,并检测细胞活力;随机分为7组:对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、吗啡预处理组(M组)、舒芬太尼预处理组(S组)、JNK抑制剂组(IJ组)、JNK抑制剂+吗啡预处理组(MJB组)、JNK抑制剂+舒芬太尼预处理组(SJB组).缺氧前30min,各处理组分别按相应分组给予吗啡(0.3μmol· L-1)、舒芬太尼(0.3×10-3μmol·L-1)、JNK抑制剂(SP600125,20μmol·L-1)、SP600125+吗啡(20μmol·L-%0.3μmol·L“)、SP600125+舒芬太尼(20μmol·L-1+0.3× 10-3μmol· L-1)处理,激光共聚焦显微镜观察各组Cx43的变化并测定平均荧光密度;Western blot检测各组Cx43蛋白及Ser368位点的磷酸化蛋白的表达.结果 与C组比较,其余各组p-Cx43Ser368及Cx43蛋白表达降低(P＜0.05);与H/R组比较,M组、S组、MJB组、SJB组p-Cx43Ser368及Cx43蛋白表达升高(P＜0.05),U组差异无统计学意义(P＞0.05);与M组比较,IJ组p-Cx43Ser368及Cx43蛋白表达降低(P＜0.05),S、MJB组表达差异无统计学意义(P＞0.05);与S组比较,IJ组p-Cx43Ser368及Cx43蛋白表达降低(P＜0.05),SJB组表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 缺氧/复氧损伤条件下,舒芬太尼预处理可以产生与吗啡类似的稳定心肌Cx43的保护作用,这种作用可能与JNK信号通路有关.