百令胶囊加还原型谷胱甘肽含药血清对NRK-49F细胞增殖的影响

目的 探讨百令胶囊加还原型谷胱甘肽(GSH)含药血清对大鼠间质成纤维细胞NRK-49F增殖及信号分子转化生长因子-β1(TGF-β1)、Sma和Mad相关蛋白(Smad)表达水平的影响.方法 采用单侧输尿管梗阻组大鼠制备含药血清(百令胶囊1.5 g/kg联合GSH 300 mg/kg)和不含药血清.将对数生长期细胞分为正常对照组、模型组(10 ng/mlTGF-β1)、阴性对照组(10 ng/ml TGF-β1+ 10％不含药血清)和药物干预组(10 ng/ml TGF-β1+ 10％含药血清).显微镜下观察各组细胞形态,采用CCK8检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞周期分布;RT-PCR检测各组细胞TGF-β1/Smad信号通路转录水平的表达;Western blot检测各组细胞TGF-β1/Smad信号通路蛋白表达水平.结果 与正常对照组相比,模型组和阴性对照组NRK-49F细胞增殖活性增加(P＜0.05),G0/G1期细胞减少(P＜0.05),S期细胞增加(P＜0.05),增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、α肌动蛋白(α-SMA)、磷酸化Smad2/Smad2(p-Smad2/Smad2)、p-Smad3/Smad3的表达上调(P＜0.05);与阴性对照组相比,药物干预组NRK-49F细胞增殖活性下降(P＜0.05),G0/G1期细胞增加(P＜0.05),S期细胞减少(P＜0.05),PCNA、Cyclin D1、CollagenⅠ、α-SMA、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3的表达下调(P＜0.05).结论 百令胶囊加GSH含药血清可能通过抑制TGF-β1/Smad的表达,抑制肾间质纤维化.