牙龈卟啉单胞菌PrtC蛋白体外表达、纯化及功能初探
Acta Universitatis Medicinalis Anhui（2020）
摘要
目的 牙龈卟啉单胞菌PrtC蛋白体外表达纯化及功能初探.方法 全基因合成牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)ATCC33277中prtC基因,构建重组表达载体p29-prtC,生物信息学分析和低温诱导表达、SDS-PAGE、Western blot鉴定,酶解法检测胶原酶的功能.结果 成功构建了PrtC蛋白原核表达载体,在大肠杆菌表达体系内获得可溶蛋白表达,通过亲和层析和分子筛层析纯化出高纯度且较稳定的PrtC蛋白,并且实验证明它具有降解胶原蛋白的能力.结论 体外生化实验说明PrtC蛋白具有胶原蛋白酶活性,并且为后续解析PrtC蛋白的结构奠定了基础.
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