NADPH氧化酶Nox2和Nox4在小鼠肠炎中的表达及意义

目的 探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶家族的主要成员NADPH 氧化酶2 (Nox2) 和Nox4 在小鼠肠炎模型结肠组织中的表达及意义.方法 选用6 ～ 8周龄的129S /SV 雄性小鼠建立结肠炎模型,将其随机分为对照组、1. 5％葡聚糖硫酸钠(DSS) 组和3. 0％ DSS 组,对照组自由饮水,1. 5％ DSS 组和3. 0％ DSS 组分别给予含 1. 5％ DSS 和3. 0％ DSS 饮用水自由饮用6 d.通过体质量变化、疾病活动指数(DAI) 评分和组织病理学评分等方法评估肠道炎症程度.使用酶标仪间接测定小鼠血清中丙二醛(MDA) 的含量,以评估实验小鼠的氧化应激程度.采用实时定量PCR 技术检测结肠组织中促炎因子白介素-1β (IL-1β)、白介素-6 (IL-6) 和肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 以及Nox2 和Nox4 mRNA 表达情况;采用免疫组织化学法检测结肠组织中Nox2 和Nox4 蛋白表达情况.结果 对照组小鼠未见肠炎表现,1. 5％ DSS 组小鼠呈轻度肠炎表现,3. 0％ DSS 组小鼠呈重度肠炎表现.杯状细胞在1. 5％ DSS 组体积增大、数量减少,在3. 0％ DSS 组进一步减少,甚至消失(均P < 0. 05).MDA 在1. 5％ DSS 组升高,在3. 0％ DSS 组进一步升高(均P < 0. 05).Nox2 和Nox4 mRNA 和蛋白的表达量在不同炎症程度时表达不同.两者mRNA 和蛋白的表达量一致,炎症组均显著高于对照组,且均随炎症程度增加表达进一步增加(均P < 0. 05).Nox2 蛋白主要表达于浸润的吞噬细胞和中性粒细胞等炎细胞中;Nox4 蛋白表达于中性粒细胞和淋巴细胞等炎细胞中.结论 Nox2 和Nox4在小鼠肠炎的发病过程中发挥重要作用.