弓形虫Tg Hly-Ⅲ蛋白诱导虫体从宿主细胞逸出

目的 检测外源性弓形虫三型溶血素(Tg Hly-Ⅲ)蛋白诱导弓形虫逸出的效果和分子机制.方法 通过在线软件预测Tg Hly-Ⅲ的功能与结构,外源表达Tg Hly-Ⅲ蛋白,并用其孵育感染弓形虫的宿主细胞,用流式细胞仪在不同时间点检测逸出虫体数目;用免疫印迹检测宿主细胞凋亡相关蛋白的表达水平;用不同阻断剂阻断虫体钙离子、运动能力和细胞凋亡、程序性坏死通路,检测Tg Hly-Ⅲ诱导虫体逸出效果.结果 Tg Hly-Ⅲ在序列上具有较高的保守性,具有膜穿孔功能;外源表达的Tg Hly-Ⅲ可有效诱导弓形虫从宿主细胞逸出,并且此种逸出依赖于虫体内钙离子和虫体的运动能力;阻断宿主细胞凋亡途径后,Tg Hly-Ⅲ诱导虫体逸出效率显著降低,并且Tg Hly-Ⅲ孵育可以提高宿主细胞凋亡相关蛋白Bax的表达和JNK、p38的磷酸化水平.结论 Tg Hly-Ⅲ可以通过细胞凋亡途径诱导虫体从宿主细胞逸出,这类逸出与虫体钙离子和运动能力有关.