靶向抑制 DNMT1对人脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的：应用靶向 DNA 甲基转移酶1（DNMT1）基因的小干扰 RNA（siRNA）重组质粒来转染体外培养的人脑胶质瘤细胞，观察其对胶质瘤细胞增殖活性的影响。方法实验组予以 siRNA-DNMT1序列进行转染，对照组仅予以 siRNA-阴性对照序列。应用 qRT-PCR 分析 DNMT1基因表达变化， Western blot 法分析 DNMT1、PCNA 和 Cyclin D1蛋白表达变化，MTT 法检测细胞增殖生长能力，细胞克隆法分析细胞增殖克隆形成能力。结果与对照组比较，qRT-PCR 结果表明实验组 DNMT1 mRNA 表达明显减少（ P <0.01）；Western blot 法表明实验组 DNMT1、PCNA 和 Cyclin D1蛋白表达水平明显降低（P <0.01）；MTT 法检测表明实验组中活细胞数明显低于对照组（P <0.05）；细胞克隆法表明实验组细胞的增殖克隆形成能力明显低于对照组（ P <0.01）。结论靶向 DNMT1基因的 siRNA 重组质粒可减少人脑胶质瘤细胞内 DNMT1基因的表达，从而抑制胶质瘤细胞的增殖。