LincRNA-p21敲减对胃癌细胞生长和转移的影响及其作用机制

Journal of Jilin University(Medicine Edition)(2020)

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Abstract
目的:探讨LincRNA-p21敲减对胃癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并阐明其作用机制.方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测胃癌组织、癌旁组织以及3种胃癌细胞(MGC-803、MKN-45和SGC-790)和正常胃黏膜上皮细胞GES-1中LincRNA-p21 mRNA表达水平.以MGC-803细胞作为研究对象,实验分为sh-NC组、sh-LincRNA-p21组和AG490+ sh-LincRNA-p21组.sh-NC组MGC-803细胞采用慢病毒感染sh-NC;sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞采用慢病毒感染sh-LincRNA-p21;AG490+sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞采用慢病毒感染sh-LincRNA-p21后,再采用10 μg·L-1 AG490处理细胞.采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)掺入法检测各组MGC-803细胞EdU掺入百分比,CCK-8法检测各组MGC-803细胞活性,Transwell法检测各组MGC-803细胞迁移数和侵袭数,Western blotting法检测sh-NC组和sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞中p-JAK1、p-STAT3和p-STAT5蛋白表达水平.将sh-NC组和sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞移植入BALB/c裸鼠颈部皮下成瘤,检测瘤体体积和质量.结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中LincRNA-p21 mRNA表达水平明显降低(P<0.01);与GES-1细胞比较,MGC-803、MKN-45和SGC-790细胞中LincRNA-p21表达水平均明显降低(P<0.01).与sh-NC组比较,sh-LincRNA-p21组MGC 803细胞EdU掺入百分比、细胞活性、细胞迁移数和侵袭数、p-JAK1、p-STAT3和p-STAT5蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01);与sh LincRNA p21组小鼠比较,AG490+ sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞活性、细胞迁移数和侵袭数均明显降低(P<0.05或P<0.01).裸鼠成瘤实验,与sh-NC组比较,sh-LincRNA-p21组小鼠瘤体体积和质量均明显增加(P<0.05或P<0.01).结论:敲减LincRNA-p21可明显促进胃癌细胞的生长与转移,且该促进作用可能与其促进JAK-STAT信号通路活性有关.
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