鹿茸多肽对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3增殖和胶原蛋白分泌能力的影响及其机制

目的:探讨鹿茸多肽对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3增殖和胶原蛋白分泌能力的影响,并阐明其相关作用机制.方法:选取对数生长期的NIH/3T3细胞,加入不同剂量(1.56、3.13、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00和200.00 mg·L-1)鹿茸多肽作为实验组,以加入0 mg· L-1鹿茸多肽的细胞作为空白对照组,以加入50 μg·L-1碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的细胞作为阳性对照组.MTT法检测各组NIH/3T3细胞存活率,ELISA法检测各组NIH/3T3细胞中胶原蛋白分泌情况,划痕愈合实验检测各组NIH/3T3细胞的迁移能力,Western blotting法检测各组NIH/3T3细胞的细胞外调节蛋白激酶1/2 (ERK 1/2)的磷酸化蛋白(p-ERK 1/2)表达水平,免疫荧光法检测转化生长因子β1(TGF-β1)的表达情况.结果:与空白对照组比较,阳性对照组和6.25、12.50、25.00、50.00、100.00及200.00 mg·L-1鹿茸多肽组细胞存活率明显升高(P＜0.05或P＜0.01).与空白对照组比较,阳性对照组和6.25、12.50、25.00和50.00 mg·L-1鹿茸多肽组NIH/3T3细胞培养液中Ⅰ型胶原蛋白水平明显升高(P＜0,05或P＜0.01),阳性对照组和12.50及25.00 mg·L-1鹿茸多肽组NIH/3T3细胞培养液中Ⅲ型胶原蛋白水平明显升高(P＜0.05).与空白对照组比较,阳性对照组和12.50mg· L-1鹿茸多肽组细胞划痕愈合率、NIH/3T3细胞中p-ERK 1/2表达水平及NIH/3T3细胞质中TGF-β1表达水平均明显升高(P＜0.05或P＜0.01).结论:鹿茸多肽能促进NIH/3T3细胞增殖和胶原蛋白分泌,并提高其迁移能力,其作用机制是可能是通过激活ERK 1/2磷酸化及增加TGF-β1表达实现的.