氯化钴对人卵巢癌SKOV3细胞顺铂敏感性的影响

目的:观察氯化钴 (CoCl2) 作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后对SKOV3细胞顺铂敏感性的影响, 并阐述其可能机制.方法:体外培养SKOV3细胞株, 随机分为对照组、CoCl2组、顺铂 (DDP) 组和CoCl2联用DDP (联合) 组, CoCl2组细胞以200μmol·L-1 CoCl2作用4h后换普通细胞培养基培养20h, DDP组细胞以含10 mg·L-1 DDP的细胞培养基培养24h, 联合组细胞以200μmol·L-1 CoCl2作用4h后更换含10mg·L-1 DDP的细胞培养基继续培养20h.MTT法检测各组细胞存活率, 免疫荧光法检测各组细胞中低氧诱导因子1α (HIF-1α) 和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS) 阳性表达强度, Rhod 2-AM荧光探针检测各组细胞线粒体钙离子 (Ca2+) 水平, 免疫蛋白印迹 (Western blotting) 法观察凋亡相关蛋白细胞色素C (cyto C) 、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase 3) 和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (cleaved caspase 3) 蛋白表达水平, Muse○R凋亡试剂盒检测各组细胞凋亡率.结果:与对照组比较, CoCl2组细胞存活率无明显变化 (P＞0.05) , 其余2组细胞存活率明显下降 (P＜0.05) ;且联合组高于DDP组 (P＜0.05) .与对照组比较, CoCl2组和联合组细胞中HIF-1α阳性表达强度明显增强 (P＜0.05) ;DDP组和联合组细胞中iNOS阳性表达强度明显增强 (P＜0.05) .与对照组比较, DDP组和联合组细胞Ca2+水平升高 (P＜0.05) ;且DDP组高于联合组 (P＜0.05) .与对照组比较, CoCl2组细胞中cyto C、caspase 3和cleaved caspase 3蛋白表达水平无明显变化 (P＞0.05) , DDP组细胞中cyto C、caspase 3和cleaved caspase 3蛋白表达水平明显升高 (P＜0.05) ;且联合组低于DDP组 (P＜0.05) .与对照组比较, DDP组细胞凋亡率明显升高 (P＜0.05) ;联合组细胞凋亡率较DDP组降低 (P＜0.05) .结论:CoCl2可以通过抑制DDP诱导的人卵巢癌SKOV3细胞株iNOS表达增强来减少线粒体途径凋亡的发生, 降低其顺铂敏感性.