氯化锂对地塞米松诱导的大鼠胰岛β细胞凋亡的影响及其机制

目的:建立地塞米松(Dex)诱导的大鼠胰岛INS-1细胞凋亡模型,探讨氯化锂(LiCl)对Dex诱导的胰岛β细胞凋亡的影响及其可能机制.方法:将INS-1细胞分为对照组、0.1 μmol·L-1Dex组和LiCl+0.1 μmol·L-1Dex组.TUNEL染色和Annexin Ⅴ/PI染色法检测各组INS-1细胞凋亡率,Real-time PCR法检测各组INS-1细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、诱导型-氧化氮合酶(iNOS)、NADPH氧化酶4(Nox4)、NADPH oxidase (p47phox)和糖原合成酶激酶3β(GSK-3β) mRNA表达水平,Western blotting法检测各组INS-1细胞中GSK-3β、p-GSK-3、SOD、iNOS和Nox4蛋白表达水平,GENMED试剂盒检测各组NIS-1细胞中活性氧(ROS)水平,Griess法检测各组INS-1细胞中一氧化氮(NO)水平.结果:与对照组比较,0.1 μmol·L-1Dex组INS-1细胞凋亡率升高(P＜0.05),SOD mRNA和p-GSK-3β蛋白表达水平降低(P＜0.05),细胞中Nox4、p47phox、iNOS mRNA表达水平升高(P＜0.05),细胞中ROS和NO水平升高(P＜0.05);与0.1 μmol·L-1 Dex组比较,LiCl+0.1 μmol·L-1Dex组INS-1细胞凋亡率降低(P＜0.05),SOD mRNA和p-GSK-3β蛋白表达水平升高(P＜0.05),细胞中Nox4、p47phox和iNOS mRNA表达水平降低(P＜0.05或P＜0.01),细胞中ROS和NO水平降低(P＜0.05).结论:Dex可诱导大鼠胰岛β细胞凋亡,LiCl可通过抑制GSK-3β活性减轻Dex诱导的胰岛β细胞凋亡.