激活足细胞环腺苷酸信号调节细胞磷酸化ERM和CLIC5的表达

目的 研究足细胞内环腺苷酸(cAMP)信号对足细胞标志蛋白Podocalyxin、细胞内氯离子通道蛋白5(CLIC5)及相关的埃兹蛋白-根蛋白-膜突蛋白(ERM)表达的影响.方法 构建阿霉素(ADR)肾病小鼠模型,部分小鼠使用腺苷酸环化酶激活剂Forskolin治疗(ADR组和ADR+ Forskolin组).考马斯亮蓝染色法测定尿液中蛋白质含量;电子显微镜观察足突宽度;免疫荧光染色和Western blotting检测足细胞中磷酸化ERM(P-ERM)、CLIC5和Podocalyxin的表达.结果 与ADR组比较,ADR+ Forskolin组小鼠尿白蛋白含量明显减少,足突增宽显著改善(P＜0.05).Western blotting和免疫荧光染色结果显示:与ADR组比较,ADR+Forskolin组小鼠足细胞内P-ERM、Podocalyxin和CLIC5蛋白表达及共定位均显著增加.Western blotting检测结果显示:体外以嘌呤霉素氨基核苷(PAN)孵育足细胞72 h,可使P-ERM和CLIC5的表达显著减少(P＜0.01);Epac信号激动剂2Me-cAMP预处理可防止PAN诱导的足细胞P-ERM低表达,而PKA信号激动剂pCPT-cAMP预处理可防止PAN诱导的CLIC5表达减少.结论 Forskolin可减轻ADR肾炎小鼠的白蛋白尿,改善足突融合,缓解Podocalyxin/ CLIC5/ERM蛋白复合体低表达.cAMP分别通过PKA和Epac信号通路防止PAN诱导的CLIC5和P-ERM表达降低.