沉默ECT2对食管癌EC109细胞增殖、细胞周期和裸鼠成瘤能力的影响

目的:探讨shRNA沉默ECT2对食管癌EC109细胞增殖和裸鼠成瘤能力的影响及其机制.方法:将体外培养的EC109细胞分为对照组(未感染)、shRNA-NC组(感染shRNA-NC慢病毒)和shRNA-ECT2组(感染shR-NA-ECT2慢病毒),采用RT-PCR检测各组细胞中ECT2 mRNA的表达,Western blot检测ECT2、细胞周期蛋白1(CyclinD1)和细胞周期依赖蛋白激酶2(CDK2)蛋白的表达,CCK-8和碘化丙啶染色检测细胞的增殖活力和细胞周期.将3组细胞接种于裸鼠皮下,建立食管癌裸鼠移植瘤模型,每组11只,喂养30 d后处死裸鼠,剥离肿瘤组织,测量肿瘤体积并称取瘤体质量,采用Western blot检测肿瘤组织中P21和P53蛋白的表达情况.结果:与对照组和shRNA-NC组相比,shRNA-ECT2组细胞中ECT2 mRNA和ECT2、CyclinD1、CDK2蛋白的表达水平、细胞增殖活力和S期细胞百分比均明显降低,G0/G1期细胞百分比明显升高(P<0.05);与对照组和shRNA-NC组相比,shRNA-ECT2组移植瘤体积和瘤体质量均减小,而P21和P53蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05).结论:shRNA沉默ECT2可抑制食管癌EC109细胞增殖和成瘤能力,其作用机制可能与促进P21和P53蛋白的表达有关.