不同培养液对肾癌患者外周血T淋巴细胞体外扩增及CXC趋化因子受体3表达的影响

目的:探讨不同培养液对肾癌患者外周血T淋巴细胞体外扩增及CXC趋化因子受体3(CXCR3)表达的影响.方法:密度梯度离心法分离肾癌患者PBMC,分为4组,分别用4种培养液(GT-T551、GT-T551 H3、ALyS505N、X-VIVOTM15)培养,应用CD3单克隆抗体、重组人纤维连接蛋白、白细胞介素2、干扰素γ诱导、活化PB-MC.显微镜下观察细胞形态并进行细胞计数,采用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群比例及膜表面CXCR3的表达情况.结果:4组细胞培养至第13天状态良好,第16天开始逐渐老化,组间无明显差异.4组细胞增殖倍数均于第16天达到峰值;培养第22、25天,GT-T551 H3组细胞增殖倍数低于ALyS505N组和X-VIVOTM15组(P<0.05).CD3+、CD3+CD8+及CD3+CD56+T淋巴细胞比例随培养时间的延长逐渐提高,CD3+CD4+T淋巴细胞的比例逐渐下降;GT-T551 H3组的CD3+T淋巴细胞比例在培养第15天低于其他3组(P=0.042),而CD3+CD56+T淋巴细胞比例在培养第11、13、15天高于其他3组(P<0.05).与活化前相比,各组T淋巴细胞亚群中CXCR3阳性细胞比例均有显著提高,在第13天后降低,呈先高后低的变化趋势(P<0.05).结论:4种培养液对肾癌患者PBMC形态和最高增殖倍数的影响差异无统计学意义;GT-T551 H3培养液更适用于NKT淋巴细胞的培养;4种培养液均可以提升T淋巴细胞亚群表面CXCR3的表达水平,13 d为较好的培养周期.