Ghrelin预处理骨髓间充质干细胞来源上清液对内皮细胞增殖、迁移及凋亡的影响

[目的]研究生长激素释放肽(ghrelin)预处理骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源上清液对内皮细胞增殖、迁移及凋亡的影响,并初步探索其作用机制.[方法]全骨髓贴壁分离法提取大鼠BMSCs,利用流式细胞术鉴定BMSCs表面分子标记.收集BMSCs上清液及高、中、低浓度(100 nmol/L、10 nmol/L、1 nmol/L)ghrelin预处理BMSCs 24 h后上清液,以无血清培养基为对照,将上清液分别加入人脐静脉细胞融合细胞(EA.hy926)作用24 h,利用CCK8法检测各组细胞活力,划痕实验评估各组细胞迁移能力.上述各组细胞加入脂多糖处理24 h后,用Annexin V法检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞凋亡蛋白bax、caspase3及β?catenin表达情况.[结果]与未处理BMSCs相比,高浓度ghrelin预处理BMSCs来源上清液能增强内皮细胞活力及迁移能力,差异有统计学意义(P<0.05),流式细胞结果显示,100 nmol/L ghrelin预处理BMSCs组内皮细胞凋亡率(34.51±3.51)％较未处理BMSCs组(41.11±1.83)％显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示,100 nmol/L ghrelin预处理BMSCs组较未处理BMSCs组凋亡蛋白bax及caspase 3与β?catenin表达下降.[结论]Ghrelin预处理BMSCs可以改善内皮细胞功能,其中抗内皮细胞凋亡作用可能与其抑制Wnt/β?catenin通路激活有关.