人脂肪干细胞膜片的构建及其生物学特性初探

目的 利用分离纯化后的人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)构建ADSCs膜片,并探讨人ADSCs膜片的生物学特性.方法 收集年轻女性腹部手术皮下脂肪组织,用酶消化法成功分离纯化人ADSCs,进行流式细胞学鉴定,使用含有活性因子的完全培养基诱导构建人片后,扫描电镜观察细胞膜片组织形态,并采用qRT-PCR和ELISA检测人脂肪干细胞膜片相关促生长细胞因子及干性基因的表达水平.结果 成功分离人ADSCs,流式细胞学鉴定发现其间充质干细胞表面标记分子CD29、CD44、CD90、CD105均为阳性,造血干细胞表面标记CD45分子为阴性,符合ADSCs表面分子表达特点;人ADSCs进行成脂和成骨诱导后,油红O与茜素红染色阳性,提示人ADSCs具有多向分化潜能;扫描电镜观察膜片中的细胞呈网格样叠加生长,细胞之间连接紧密;qRT-PCR检测结果 显示人ADSCs膜片中TGF-β 1、FGF2、HGF、VEGF、Col 1A1等促生长细胞因子和OCT4、NANOG等干性基因显著高表达.ELISA检测结果 显示人ADSCs膜片上清液高表达促生长细胞因子TGF-βl、FGF、HGF、VEGF.结论 我们成功利用人ADSCs诱导成人细胞膜片,该膜片可分泌更高含量的促生长细胞因子并表达更高水平的干性基因,为人ADSCs膜片应用于组织损伤修复提供了重要理论依据.