GW4064激活法尼酯X受体抑制结肠癌细胞生长浸润及基质细胞衍生因子1的表达

目的 探讨法尼酯X受体(FXR)特异性激动剂GW4064抑制结肠癌细胞生长浸润的机制.方法 体外培养人结肠癌细胞系HT-29,用浓度为0、0.1、1、3、5、7、10 μmol/L的GW4064分别处理HT-29细胞72 h,采用MTT法检测细胞活力;用浓度为0、1、5μmol/L的GW4064分别处理HT-29细胞24 h,用相差显微镜观察细胞形态;用浓度为0、1 μmol/L的GW4064分别处理HT-29细胞24 h,采用细胞划痕实验检测细胞浸润的变化;用浓度为0、1、5 μmol/L的GW4064分别处理HT-29细胞24h,采用PCR检测FXR mRNA和基质细胞衍生因子1(SDF-1)mRNA表达的变化;用浓度为0、1、5、7μmol/L的GW4064分别处理24 h,采用ELISA法检测细胞培养上清液中SDF-1表达的变化.于裸鼠皮下接种HT-29细胞建立裸鼠成瘤模型,灌胃给予GW4064或溶剂DMSO,16d后检测肿瘤生长情况及瘤体中FXR与SDF-1 mRNA的表达.结果 GW4064处理HT-29细胞后,细胞生长受到抑制,且呈剂量依赖性,1、3、5、7、10 μmol/L GW4064组HT-29细胞的生长活力与对照组(0μmol/L)相比差异均有统计学意义(P均＜0.05).用相差显微镜观察可见GW4064处理HT-29细胞后,细胞收缩变圆,从瘦长的细胞向表皮样细胞改变.细胞划痕实验结果显示GW4064处理HT-29细胞后,细胞迁移距离变短,与对照组(0μmol/L)相比差异有统计学意义(P＜0.05).PCR检测结果显示GW4064处理后FXR mRNA表达呈剂量依赖性增加,而SDF-1mRNA表达则相反.ELISA检测结果显示细胞培养上清液中SDF-1的表达量随着GW4064浓度的增加而逐渐下降,1、5、7 μmol/L GW4064组与对照组(0μmol/L)相比差异均有统计学意义(P均＜0.05).给予GW4064后,荷瘤小鼠肿瘤体积变小,与对照组(给予DMSO)相比差异有统计学意义(P＜0.05),并且瘤体内FXR mRNA表达增加、SDF-1 mRNA表达减少.结论 FXR激活后抑制了结肠癌细胞生长浸润,同时抑制了结肠癌细胞SDF-1的表达分泌.