B超引导下胎羊体内人干细胞移植及其向肝脏细胞分化的研究

目的:建立B超引导下胎羊体内人干细胞移植模型,及移植细胞向肝脏细胞体内分化的检测方法.方法:通过B超引导下的穿刺,将(0.5～3)×107 人干细胞移植入发育50～60 d的胎羊体内(n=6);移植后110～120 d取材分析,用人HLA-DR引物PCR检测人源性细胞的嵌合;用人特异性肝细胞、白蛋白、CK18抗体免疫组化染色及Alu探针原位杂交,检测移植细胞向肝脏细胞的分化.结果:在移植的6只胎羊中,5只顺利生产;PCR检测显示5只实验羊肝脏组织中均有人源性细胞的嵌合;免疫组化及Alu探针原位杂交显示人源性细胞分布于门管区周围和肝小叶中,表达白蛋白、CK18等肝细胞分化标志;Alu探针阳性细胞也分布于胆管上皮中.结论:胎羊体内干细胞移植模型及其向肝脏细胞分化的检测,可以有效地显示人干细胞体内向肝脏细胞分化的潜能.