水飞蓟宾对肾间质纤维化的治疗作用及机制

目的:研究水飞蓟宾对肾间质纤维化模型大鼠的保护作用及机制.方法:8周龄雄性SD大鼠36只,随机分成假手术组、模型组及治疗组,模型组及治疗组采用左侧输尿管梗阻方法复制肾间质纤维化模型,假手术组大鼠只做手术(不结扎输尿管),治疗组造模同时给予灌胃水飞蓟宾至处死前[200 mg/(kg·d)],假手术组和模型组注射等量生理盐水灌胃;各组大鼠分别于术后第7和14天处死(6只/组),取肾组织行HE染色观察大鼠肾组织病理改变、Masson染色以观察各组大鼠肾间质胶原的沉积,行免疫组化染色观察观察大鼠肾脏组织切片中Ski、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、smad3及纤维连结蛋白(FN)的表达;Western Blot检测肾脏组织匀浆中Ski 、TGF-β1、smad3 、FN蛋白表达水平,Pearson法分析Ski与TDI、TFI、TGF-β1、smad3及FN表达的相关性.结果:HE、Masson染色结果显示,假手术组大鼠肾小球、肾小管未见异常,模型组大鼠HE染色可见肾小管上皮细胞肿胀、空泡变性及基底膜增厚,Masson染色肾小管、肾间质可见纤维阳性染色,第14天时更严重;治疗组各时点肾脏病变程度均较同期模型组减轻,模型组大鼠的TDI和TFI评分均高于假手术组,治疗组较模型组有所降低,第14天时变化更大(P＜0.05);肾脏组织免疫组化结果显示,与假手术组比较,模型组SKi表达明显减少,TGF-β1、smad3及FN表达明显升高,第14天时变化更明显(P＜0.05);与模型组比较,治疗组Ski有所增加,但仅第14天差异有统计学意义(P＜0.05),TGF-β1、smad3、FN显显著降低,第14天组更为明显(P＜0.05);肾脏组织匀浆Western Blot结果显示,与假手术组比较,模型组SKi表达少明显减,TGF-β1、smad3 、FN表达明显升高,第14天时变化更明显(P＜0.05);与模型组比较,治疗组Ski显著增加,TGF-β1、smad3、FN显显著降低,第14天组时变化更明显(P＜0.05);Pearson相关分析显示,Ski表达与TDI、TFI、TGF-β1、smad3、FN均呈显著负相关(P＜0.05).结论:水飞蓟宾可能通过上调Ski阻遏TGF-β/smad信号通路改善肾间质纤维化模型大鼠的肾间质纤维化过程.