腺病毒介导的 DPP6过表达载体的构建及其在大鼠心肌细胞内表达的鉴定

目的：构建腺病毒介导的 DPP6过表达载体并验证其在大鼠心肌细胞内的表达。方法：应用 PCR 技术扩增目的基因 DPP6，经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体 pShuttle-CMV 中，进而转化至含有 AdEasy 质粒的大肠杆菌中，进行重组；所产生的腺病毒载体转染在 HEK-293细胞中，进行腺病毒的包装、分泌和扩增，所得病毒感染大鼠心肌细胞，进行荧光及实时定量 PCR（qPCR）鉴定。结果：DPP6过表达腺病毒载体构建成功，经 HEK293细胞包装、扩增后，所得病毒可成功感染初生大鼠心肌细胞，观测到腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达，qPCR 检测DPP6 mRNA 表达明显升高。结论：成功构建了腺病毒介导的 DPP6过表达载体，并在大鼠心肌细胞内成功表达，为进一步研究 DPP6在心肌细胞内的功能奠定了基础。